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相對分子質(zhì)量校正曲線標準品

相對分子質(zhì)量校正曲線標準品可通過體積排阻色譜法,繪制小分子蛋白或者多肽類樣品的(如膠原蛋白肽,低聚肽粉,膠原三肽)相對分子質(zhì)量校正曲線。通過這個方法,可以建立一種能有效測定多肽相對分子質(zhì)量的方法。相對分子質(zhì)量校正曲線標準品一般包括五種物質(zhì)。

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對分子質(zhì)量校正曲線標準品可通過體積排阻色譜法,繪制小分子蛋白或者多肽類樣品的(如膠原蛋白肽,低聚肽粉,膠原三肽)相對分子質(zhì)量校正曲線。通過這個方法,可以建立一種能有效測定多肽相對分子質(zhì)量的方法。相對分子質(zhì)量校正曲線標準品一般包括五種物質(zhì),分別是:甘氨*-甘氨*-甘氨*標準品,相對分子質(zhì)量189;甘氨*-甘氨*-酪氨*-精氨*標準品,相對分子質(zhì)量451;桿菌酶標準品,相對分子質(zhì)量1411;抑肽*標準品,相對分子質(zhì)量6511;細胞色素*標準品,相對分子質(zhì)量12311。

測定相對分子質(zhì)量的方法有多種,如超濾法、凝膠電泳法、體積排阻色譜法、質(zhì)譜法等。其中超濾法只能較為粗略地測定相對分子質(zhì)量分布,在分離純化部分應用較多;凝膠電泳法存在操作繁瑣、重現(xiàn)性差的缺點,且對小肽的相對分子質(zhì)量測定有很大的局限性,適用于蛋白質(zhì)、多肽相對子質(zhì)量分布研究的初期階段;質(zhì)譜法能較為精確地測定分子質(zhì)量分布,但設備昂貴,不宜做常規(guī)分析手段;體積排阻色譜法具有操作簡便快速、重復性好、精確度高的特點,已廣泛應用于多肽、蛋白等大分子物質(zhì)的相對分子質(zhì)量及其分布的測定。

體積排阻色譜法是利用凝膠把分子大小不同的物質(zhì)分離開的一種方法。凝膠是一種具有立體網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)且呈多孔的不溶性珠狀顆粒物質(zhì),對于某種型號的凝膠,一些大分子不能進入凝膠顆粒內(nèi)部而被排阻在外,只能沿著顆粒間的縫隙流出柱外;而一些小分子不被排阻,可自由擴散,滲透進入凝膠內(nèi)部的篩孔,然后又被流出的洗脫液帶走。分子越小,進入凝膠內(nèi)部越深,所走的路程越多,故小分子最后流出柱外,而大分子先從柱中流出。一些中等大小的分子介于大分子與小分子之間,只能進入一部分凝膠較大的孔隙,亦即部分排阻,因此這些分子從柱中流出的順序也介于大、小分子之間。因此,樣品經(jīng)過凝膠層析后,分子便按照從大到小的順序依次流出,達到分離的目的。

相對分子質(zhì)量校正曲線標準品在國標中也有廣泛應用,

比如:GB 31645-2018 膠原蛋白肽

GB/T 22729-2008 海洋魚低聚肽粉

QB/T 4707-2014 玉米低聚肽粉

QB/T 5298-2018 小麥低聚肽粉

T/SNHFA 013-2021 海參低聚肽粉

綜上,相對分子質(zhì)量校正曲線標準品可以簡便快速的測定多肽、蛋白等大分子物質(zhì)的相對分子質(zhì)量及其分布。


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